I kemi er fortynding processen med at reducere koncentrationen af et stof i en opløsning. Kædfortynding er gentagen fortynding af en opløsning for hurtigt at øge fortyndingsfaktoren. Denne procedure udføres normalt i eksperimenter, der kræver meget fortyndede løsninger med høj nøjagtighed. Eksempelvis eksperimenter med koncentrationskurver på en logaritmisk skala eller eksperimenter for at bestemme tætheden af bakterier. Kædefortyndinger bruges i vid udstrækning i videnskabelige eksperimenter såsom biokemi, mikrobiologi, farmakologi og fysik.
Trin
Metode 1 af 2: Udførelse af grundfortynding
Trin 1. Bestem den passende fortyndingsopløsning
Det er meget vigtigt at bestemme den væske, der skal bruges til fortynding. Mange opløsninger er opløselige i destilleret vand, men det er ikke altid tilfældet. Hvis du fortynder bakterier eller andre celler, gør det på et dyrkningsmedium. Den væske, du vælger, bruges til alle kædefortyndinger.
Hvis du er i tvivl om hvilket fortyndingsmiddel, du skal bruge, skal du søge hjælp eller kigge online. Se efter eksempler fra andre, der har foretaget lignende kædefortyndinger
Trin 2. Forbered et antal reagensglas, der indeholder 9 ml fortyndingsmiddel
Prøverør bruges til tomme fortyndinger. Først lægges den ufortyndede prøve i det første rør, derefter foretages fortyndingerne i rækkefølge til de næste rør.
- Mærk alle rør, der bruges, før fortyndingen påbegyndes, så du ikke bliver forvirret, når eksperimentet kører.
- Hvert rør fyldes med 10 fortyndinger, startende fra det rør, hvis stof ikke er fortyndet. Fortyndingen i det første rør er 1:10, efterfulgt af 1: 100 i det andet rør, 1: 1000 for det tredje, og så videre. Bestem mængden af fortynding, der skal udføres på forhånd, så du ikke spilder fortyndingsopløsningen.
Trin 3. Forbered et reagensglas, der indeholder mindst 2 ml ufortyndet opløsning
Den mindste mængde opløsning, der skal fortyndes, der kræves for at udføre denne kædefortynding, er 1 ml. Hvis du kun bruger 1 ml, er der ingen ufortyndet opløsning tilbage. Mærk BLM for ufortyndede løsninger.
Bland opløsningen grundigt inden fortynding påbegyndes
Trin 4. Udfør den første fortynding
Tag 1 ml ufortyndet opløsning fra BLM -reagensglasset med en pipette, og kom det i et reagensglas mærket 1:10 indeholdende 9 ml fortyndingsmiddel, og bland derefter grundigt. Der er nu 1 ml ufortyndet opløsning i 9 ml fortyndingsmiddel. Opløsningen er således blevet fortyndet med en fortyndingsfaktor på 10.
Trin 5. Udfør den anden fortynding
Til den anden fortynding tages 1 ml af opløsningen fra 1:10 -røret, og derefter sættes det i 1: 100 -røret, som også indeholder 9 ml af fortyndingsmidlet. Sørg for, at opløsningen i 1:10 -røret er fuldstændig blandet, før du tilføjer den til det næste rør. Sørg igen for at fortyndingen i 1: 100 -røret er fuldstændig blandet. Opløsningen fra 1:10 røret blev fortyndet 10 gange i 1: 100 røret.
Trin 6. Fortsæt denne procedure for at udføre længere kædefortyndinger
Denne proces kan gentages så mange gange som nødvendigt for at opnå den ønskede opløsningskoncentration. I forsøg med koncentrationskurver kan du udføre kædefortyndinger for at producere et antal opløsninger med fortyndinger på 1, 1:10, 1: 100, 1: 1.000.
Metode 2 af 2: Beregning af fortyndingsfaktoren og slutkoncentrationen
Trin 1. Beregn forholdet mellem den sidste fortynding i kædefortyndingen
Det samlede fortyndingsforhold kan bestemmes ved at multiplicere fortyndingsfaktoren fra hvert trin til det sidste trin. Den matematiske illustration er med formlen Dt = D1 x D2 x D3 x… x D , D.t er den totale fortyndingsfaktor og D er fortyndingsforholdet.
- Lad os f.eks. Sige, at du foretager en 1:10 fortynding 4 gange. Slut fortyndingsfaktoren til formlen: Dt = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
- Fortyndingsfaktoren i det fjerde rør i denne kædefortynding er 1: 10.000. Koncentrationen af stoffet efter fortyndingen er 10.000 gange lavere end før det blev fortyndet.
Trin 2. Bestem koncentrationen af opløsningen efter fortynding
For at bestemme den endelige koncentration af en opløsning efter en kædefortynding, skal du kende dens oprindelige koncentration. Formlen er Cende = Cstarten/D, Cende er den endelige koncentration af den fortyndede opløsning, Cstarten er den oprindelige koncentration af den originale opløsning, og D er det forudbestemte fortyndingsforhold.
- For eksempel: Hvis du starter med en celleopløsning, hvis koncentration er 1.000.000 celler pr. Ml, og fortyndingsforholdet er 1.000, hvad er den endelige koncentration af den fortyndede prøve?
-
Ved at bruge formlen:
- Cende = Cstarten/D
- Cende = 1.000.000/1.000
- Cende = 1000 celler pr. Ml.
Trin 3. Sørg for, at alle enheder er ens
Når du udfører en beregning, skal du sørge for, at enhederne altid er de samme i slutningen af beregningen. Hvis den første enhed er celler pr. Ml, skal du sørge for, at enhederne forbliver de samme ved afslutningen af beregningen. Hvis den oprindelige koncentration er dele pr. Million (bpd), skal den endelige koncentration også være i bpj -enheder.
