Pipetter er laboratorieudstyr, der bruges til at måle og overføre meget små mængder væsker. Nøjagtighed i pipettemålinger er meget vigtig, fordi forskelle i mængden, der tabes af pipetten, kan påvirke de eksperimentelle resultater. For at sikre nøjagtighed er det vigtigt at kontrollere pipettekalibreringen hvert par måneder. Kalibreringsprocessen er nyttig til at kontrollere, om dette udstyr drypper væske i det rigtige volumen, så reparationer kan foretages om nødvendigt.
Trin
Del 1 af 2: Kontrol af kalibrering
Trin 1. Saml de nødvendige materialer
For at kontrollere kalibreringen af pipetten er det nødvendigt med en pipette, pipettespidser, destilleret vand, bægerglas, termometer, balance og vægtbæger. Den anvendte balance skal være i mikrogram for at kalibrere mikropipetten med en maksimal værdi på 1 L.
- Du skal ikke bruge mere end 5 ml vand. Fyld bægeret med vand.
- Sørg for, at pipettespidsen er korrekt og passer godt ind i pipetten.
Trin 2. Mål temperaturen på det destillerede vand
Kom termometeret i vandet og lad det sidde i mindst et minut. Hvis termometerets røde linje stadig bevæger sig, skal du vente et minut til. Efter et minut registreres temperaturen. Tag termometeret og tør det, når du er færdig.
Vandets temperatur er vigtig at kende, fordi den vil blive brugt til beregninger udført for at kontrollere kalibrering
Trin 3. Placer vægtkoppen på vægten og nulstil vægten
Ideelt set har den anvendte balance en dør og et isoleret rum indeni. Læg vægtkoppen i balancekammeret, og luk døren. Hvis din balance ikke har et skab og en dør, skal du blot lægge en vægtskål på vægten. Tryk på knappen "Zero" eller "Tare", og vent på, at vægten viser nul.
Nulstilling af vægten reducerer vægten af plastkoppen og giver dig mulighed for kun at veje vægten af stoffet, der er placeret i koppen
Trin 4. Forbered pipetten til kalibrering
Tør pipetten af med ethanol, inden du starter, og sørg for, at intet tilstopper pipettespidsen. Fastgør den korrekte pipettespids til pipettespidsen, og bestem volumenet, der skal testes.
Til kalibrering testes de mindste og største mængder, der kan fjernes fra pipetten
Trin 5. Vask pipettespidsen, før den kalibreres
Tryk på knappen til den første grænse, og dypp pipettespidsen ned i destilleret vand til en dybde på ca. 2 mm. Slip knappen for at absorbere noget af væsken, og slip derefter væsken igen ved at trykke på knappen. Gentag dette trin tre gange for at vaske pipettespidserne før brug.
Tryk på knappen til den anden grænse for at fjerne den resterende væske på pipettespidsen, og tag derefter pipetten ud af vandet
Trin 6. Sluk kalibreringsvolumen
Når pipettespidsen er placeret uden for destilleret vand, skal du trykke på knappen til den første grænse. Dyp pipettespidsen 2 mm dybt ned i destilleret vand, og slip knappen for at suge væsken ind i pipettespidsen. Vent cirka 1 sekund, før dråbespidsen fjernes fra vandet.
Sørg for, at pipettespidsen er helt nedsænket under aspirationsprocessen. Der må ikke være bobler i dråbespidsen, eller resultatet kan være forkert
Trin 7. Hæld væsken i vægtskålen på vægten
Placer pipettespidsen i bunden af vejekoppen, og tryk derefter på pipetteknappen til den første grænse. Flyt til et andet punkt, lidt væk fra vandet, og tryk derefter på knappen til den anden grænse. Hold knappen nede, løft pipettespidsen fra vejekoppen.
Hold spidsen fastgjort til pipetten, da du vil bruge den igen til nogle andre kalibreringstest
Trin 8. Noter vægten vist på vægten
Luk balancedøren, hvis du bruger en dørbalance. Vent, indtil tallene ikke ændres mere. Skriv i din notesbog.
Det er vigtigt at vente, indtil tallene på skalaen ikke ændres igen, før du skriver dem ned. Noter går galt, hvis du ikke venter
Trin 9. Gentag denne proces for at udføre læsningen mindst 10 gange
Nulstil vægten igen, vask pipettespidserne før brug, sug den samme mængde væske, fjern volumenet, og registrer derefter vægten. Registrer vægten af destilleret vand for det samme volumen, og gennemsnit derefter alle dine noter.
Du kan gentage denne proces for forskellige mængder, hvis hvert volumen testes flere gange
Del 2 af 2: Beregning af kalibreringsresultatet
Trin 1. Definer formlen for det beregnede volumen
Formlen til beregning af mængden af væske, der skubbes ud af pipetten, er V = w * Z, w er vandets vægt, Z er omregningsfaktoren baseret på vandets densitet, mens V er mængden af vandmængden fjernet.
- Variabel Z kan opnås ved at beregne tætheden af vand ved hjælp af temperaturen registreret i begyndelsen af forsøget.
- For eksempel: Hvis vandtemperaturen er 23 ° C, er Z -værdien 1.0035 g/mg.
Trin 2. Beregn det samlede gennemsnit af pipettekalibreringerne
Vandmængden, der frigives af pipetten, er blevet vejet mindst ti gange. For at gennemsnitlige alle disse værdier skal du tilføje dem alle sammen og dividere med 10. Hvis du gjorde mere eller mindre af processen, skal du lægge de samlede resultater sammen og derefter dividere med antallet af udførte forsøg.
- For eksempel: Vægten af vand fra de 10 forsøg, du udførte med 10µL pipetten, er som følger: 9, 89, 10, 01, 10, 02, 9, 99, 9, 95, 10, 04, 9, 96, 10, 01, 9, 99 og 9, 98.
- Middelværdien er: (9, 89 + 10, 01 + 10, 02 + 9, 99 + 9, 95+ 10, 04 + 9, 96 + 10, 01 + 9, 99 + 9, 98)/10 = 99, 84/10 = 9.984
Trin 3. Sæt variablerne i ligningen og løs
Når du har fundet det korrekte tal for hver variabel, skal du slutte det til formlen og fuldføre det beregnede volumen. For at løse denne ligning skal du blot gange gennemsnitsvægten af alle forsøg med Z -værdien.
For eksempel: V = w * Z = 9.984 * 1.0035 = 10, 019
Trin 4. Beregn pipettens nøjagtighed
Brug ligningen A = 100 x Vgns/V0 for at beregne pipettens nøjagtighed. A angiver pipettens nøjagtighed, Vgns er det beregnede middelvolumen, og V0 er den værdi, der er angivet på pipetten. Nøjagtighedsværdien skal være mellem 99-101%.
- Hvis pipetten er korrekt kalibreret, bør den beregnede værdi være meget tæt på den faktiske værdi, der er angivet på pipetten.
- For eksempel: A = 100 x Vgns/V0 = 100 x 10, 019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19%
- Denne pipette er korrekt kalibreret.
Trin 5. Send om nødvendigt pipetten til kalibrering
Hvis din pipette ikke består kalibreringstesten, skal du ikke bruge den til eksperimentering lige nu. Pipetter er meget skrøbelige og dyre laboratorieudstyr. Du kan ikke selv ordne kalibreringen, pipetten skal sendes ind til reparation. Alternativt vil flere virksomheder komme til dit laboratorium og kalibrere pipetten på stedet.
