Der er mange måder at måle bakterievækst på, og den ene måde er mere kompliceret end den anden. Selvom målingens konsistens undertiden skal ignoreres, er den nemmeste måde nok til at måle bakterievækst nøjagtigt, så den bruges ofte. De mest almindeligt anvendte metoder er overvågning og tælling af bakterier, måling af tør eller våd masse og måling af turbiditet/turbiditetsniveauer. Din skoles laboratorium skal have de nødvendige værktøjer og udstyr til at udføre mindst et af disse eksperimenter.
Trin
Metode 1 af 3: Monitoring Bacteria Live
Trin 1. Forbered ingredienserne
Der er mange specialværktøjer, der skal forberedes og muligvis ikke er tilgængelige i et biologilaboratorium. Forbered alt udstyr og containere, før du kører eksperimentet, så der ikke er noget besvær under processen. Du skal kende hver ingrediens, der bruges med det samme, og de grundlæggende vilkår for dette eksperiment.
- Forbered tællekammeret. Det har et indbygget kammer, mikroskopglas og mikroskop, så det er let at opsætte og bruge. Du kan købe det fra et laboratorium eller en skoleudstyrsbutik. Dette værktøj skal have instruktioner, der guider dig gennem hele processen.
- Forbered en skænke eller spredekop. Begge disse beholdere giver dig mulighed for at overvåge bakterierne indeni.
- Kultur er et begreb, der bruges til at beskrive væksten af organismer i et eksperiment.
- Bouillon er et flydende medium, hvor kulturen vokser.
Trin 2. Brug metode til hældeplade eller smøreplade
Du kan også placere bakterierne direkte på fadet til visning ved hjælp af et mikroskop. Hæld kulturen på en underkop og læg den under mikroskopet. Overvåg antallet af tilstedeværende bakterieceller.
Trin 3. Sørg for, at koncentrationsdosis er korrekt
Hvis der er for mange, vil bakterierne hobe sig op på hinanden, og du kan beregne fejl. Fortynd kulturen ved at blande mere bouillon i. Hvis der er for få, vil resultaterne af beregningen ikke være korrekte. Si bouillonen ved hjælp af et filtreringssystem.
Trin 4. Tæl bakterier
Det sidste trin er at tælle bakterierne en efter en. Se gennem forstørrelseslinsen i tællekammeret og skriv antallet af bakterier ned, du ser. Sammenlign resultaterne med resultaterne af andre tests.
Metode 2 af 3: Måling af tør og våd masse
Trin 1. Sørg for, at du har det rigtige udstyr
Denne metode bruger dyrt udstyr og meget tid. Hvis dit laboratorium ikke har det udstyr, du har brug for, er det en god idé at bruge en anden metode. Men hvis dit laboratorium er tilstrækkeligt veludstyret, anbefaler vi denne metode, da den giver mere konsekvente resultater. I denne metode skal du bruge:
- Hydraulisk tyngdekraft konvektionsovn
- Vejer beholder i aluminium
- Et sæt kolber (laboratorieflasker)
- Centrifugal maskine (centrifuge) eller laboratoriefiltreringssystem
Trin 2. Sørg for, at kulturen er i kolben
Tilsæt kulturen til græskar. På dette stadium bør kulturen være en bouillon, selvom den senere vil blive adskilt igen.
Trin 3. Tør aluminiumsbeholderen i laboratorieovnen
I stedet kan du bruge en celluloseacetatfiltermembran med en diameter på 47 mm og en porestørrelse på 0,45 µm. Uanset hvilken vejningsbeholder du bruger, skal du veje den, da den skal trækkes senere, når du vejer bakterieceller.
Trin 4. Rør kulturen i kolben, indtil den er jævnt blandet
Cellen synker naturligt på grund af tyngdekraften og skal omrøres for at sprede sig jævnt i kolben. På den måde kan du have flere prøver.
Trin 5. Brug en centrifuge til at adskille bakteriecellerne fra bouillonen
Dette værktøj roterer kolben og ækvilibrerer hurtigt, så det dræner bouillon og efterlader kulturen i kolben.
Trin 6. Skrab pastaen fra græskarret og kom den i en vægtbeholder
Smid bouillonen ud, fordi du ikke har brug for den mere. Slip dog ikke af med græskaret endnu, for det vil stadig blive brugt.
Trin 7. Skyl centrifugalmaskinen og hæld skyllevandet i beholderen
Drop skyllevandet i kolben på bakteriecellerne for at opnå den våde vægt.
Trin 8. Find tørvægten
For at måle tørvægten placeres beholderen i ovnen og tørres ved 100ºC i 6-24 timer i henhold til instruktionerne fra ovnen og/eller den anvendte vægtbeholder. Sørg for, at temperaturen ikke er for høj, så bakterierne ikke brænder på. Vej bakterierne, når de er færdige, og glem ikke at reducere resultatet med vægten af vægtbeholderen.
Metode 3 af 3: Måling af turbiditet
Trin 1. Forbered det nødvendige udstyr
Du skal bruge en lyskilde og et spektrofotometer. Begge kan fås i laboratorieforsyningsbutikker. Spektrofotometeret skal have instruktioner, der guider dig i brugen af instrumentet i henhold til den model, du har. Prisen på spektrofotometeret er ganske overkommelig og let at bruge, så det kan blive en af de mest almindeligt anvendte metoder til måling af bakterievækst.
Trin 2. Tænd prøven
Ifølge Laymans udtryk er turbiditet turbiditetsniveauet for en prøve. Du skal få turbiditetsmålingstallet, som måles i NTU (nefelometrisk turbiditetsenhed). Dette værktøj skal kalibreres, før det kan måle prøven nøjagtigt.
Trin 3. Notér resultaterne
Uklarhed påvirkes af antallet af bakterier i prøven. Spektrofotometeret fortæller dig også procentsatsen for transmission (%T). Dette tal vil stige, hvis turbiditeten falder. Sammenlign resultaterne med resultaterne af andre tests for at måle bakterievækst.
Advarsel
- Da du har at gøre med en bakteriekoloni, skal du tage forholdsregler ved at bære sikkerhedsudstyr såsom sikkerhedsbriller og handsker. Det er også en god idé at bære en maske, især hvis du ikke kender den type bakterier, der undersøges.
- Tag forholdsregler, før du håndterer nogen form for bakterier, selv den ufarlige type. Sørg for, at alle åbne sår på din krop er helt dækket, inden du starter.
